維生素AElisa試劑盒使用需要留意的事項
點擊次數(shù)：689 更新時間：2023-02-13
維生素AElisa試劑盒運用雙抗體夾心ELISA法定量測定其他血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體中維生素A(VA)ELISA試劑盒含量。實驗原理：將維生素A(VA)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的維生素A(VA)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入生物*化的維生素A(VA)抗體，將未結(jié)合的生物*化抗體洗凈后，加入HRP標記的親和素，再次洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，井在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的維生素A(VA)呈正相關(guān)。
維生素AElisa試劑盒使用注意事項：
1.試劑準備:準備一次實驗所需要的酶標條，其它的可從微孔板上拆下，密封，按照說明書要求保存，以備下次使用。
2.加樣:實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。加樣時注意不要有氣泡，將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。加樣或加試劑時，個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導(dǎo)致不同的“預(yù)溫育”時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。因此，一次加樣時間好控制在十分鐘內(nèi)。
3.溫育:為防止樣品蒸發(fā)，實驗時請將加上蓋或覆膜的酶標板置于濕盒內(nèi)，以避免液體蒸發(fā)，洗板后應(yīng)盡快進行下步操作，任何時侯都應(yīng)避免酶標板處于干燥狀態(tài)，同時應(yīng)嚴格遵守給定的溫育時間和溫度。
4.洗滌: 充分的洗滌非常重要，在每次洗滌過程中，都要將洗滌液甩干。洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響*后的酶標儀讀數(shù)。如果有自動洗板機，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
5.反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
6. 底物:底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光自接照射。
7.如果實驗室內(nèi)濕度低于60%，推薦使用加濕器提高濕度水平。
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